食品微生物学检验 霉菌和酵母计数
1、范围
本标准规定额食品中霉菌和酵母菌的技术方法。
苯标准适用于各类食品中霉菌和酵母菌的计数
2、设备和材料
除微生物实验常规霉菌及培养设备外，其他设备和材料如下：
2.1 冰箱：2℃～5℃.
2.2恒温培养箱：28℃±1℃.
2.3均质器。
2.4恒温振荡器。
2.5显微镜：10×～100×.
2.6电子天平：感量0.1g。
2.7无菌锥形瓶：容量500Ml,250Ml.
2.8无菌广口瓶：500Ml。
2.9无菌吸管：1Ml,10Ml
2.10无菌平皿：直径90mm。
2.11无菌试管：10mm*75mm。
2.12无菌牛皮纸袋，塑料袋。
3、培养基和试剂
3.1马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基；
3.2孟加拉红培养基。
4、操作步骤
4.1样品的稀释
4.1.1固体和半固体样品：称取25g样品至盛有225mL灭菌蒸馏水的锥形瓶中，充分振摇，即为1：10稀释液。或放入盛有225mL无菌蒸馏水的均质袋中，用拍击式均质器拍打2min，制成1:10的样品匀液。
4.1.2液体样品：以无菌吸管吸取25mL样品至盛有225mL无菌蒸馏水的锥形瓶中，充分混匀，制成1:10的样品匀液。
4.1.3取1mL1:10稀释液注入含油9mL无菌水的试管中，另取一支1mL无菌吸管反复吹吸，此液为1:100稀释液。
4.1.4按5.1.3操作程序，制备10倍系列稀释样品的匀液。每递增稀释一次，换用1次1mL无菌吸管。
4.1.5根据对样品污染状况的估计，选择两个至三个适宜稀释度的样品匀液（液体样品包括原液），在进行10倍递增稀释的同时，每个稀释度分别吸取1mL匀液于2个无菌平皿内，同时分别取1mL样品稀释液加入2个无菌平皿作为空白对照。
4.1.6及时将15mL～20Ml冷却至46℃的马铃薯葡萄糖琼脂或孟加拉红培养基倾注平皿。并转动平皿使其均匀。
4.2培养
待琼脂凝固后，将平板倒置，28℃±1℃培养5d,观察并记录。
4.3菌落计数
肉眼观察，必要时可用放大镜，记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母数。以菌落单位CFU表示。
选取菌落数在10CFU～150CFUDE 平板，根据菌落形态分别计数霉菌和酵母数。霉菌蔓延生长覆盖整个平板的科技路为多不可计。菌落数应采用两个平板的平均数。
5、结果和报告
5.1 计算两个平板菌落数的平均值，在将平均值乘以稀释倍数计算。
5.2若所有平板上菌落数均大于150CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，其他屏蔽你可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。
5.3若所有平板上菌落均小于10CFU，则应按稀释最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
5.4若所有稀释度平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算；如为原液，则以小于1计算。
6、报告
6.1菌落数在100以内时，按“四舍五入”原则修约，采用两位数字报告。
6.2菌落数大于或等于100时，前三位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前两位数字，后面用0代替位数来表示结果；液可用10的指数数字来表示，此时也按“四舍五入”的原则修约，采用两位有效数字。
6.3称重取样以CFU/g为单位报告。提及取样以CFU/mL为单位报告，报告或分别报告霉菌和/或酵母数。
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