鸡白细胞介素() 酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
检测范围:
使用目的:
本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素()含量。 实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡白细胞介素()水平。用纯化的鸡白细胞介素()抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素(),再与标记的白细胞介素()抗体结合,形成抗体抗原酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物显色。在酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的白细胞介素()呈正相关。用酶标仪在波长下测定吸光度(值),通过标准曲线计算样品中鸡白细胞介素()浓度。 试剂盒组成 倍浓缩洗涤液 酶标试剂 酶标包被板 样品稀释液 显色剂液 显色剂液 ×瓶 ×瓶 孔×条 ×瓶 ×瓶 ×瓶 终止液 标准品() 标准品稀释液 说明书 封板膜 密封袋 ×瓶 ×瓶 ×瓶 份 张 个 标本要求 .标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 .不能检测含的样品,因抑制辣根过氧化物酶的()活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。 号标准品 号标准品 号标准品 号标准品 号标准品 μ的原倍标准品加入μ标准品稀释液 μ的号标准品加入μ标准品稀释液 μ的号标准品加入μ标准品稀释液 μ的号标准品加入μ标准品稀释液 μ的号标准品加入μ标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样μ,待测样品孔中先加样品稀释液μ,然后再加待测样品μ(样品最终稀释度为倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育分钟。 4. 配液:将倍浓缩洗涤液用蒸馏水倍稀释后备用。
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5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置秒后弃去,如此重复
次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂μ,空白孔除外。 7. 温育:操作同。 8. 洗涤:操作同。
9. 显色:每孔先加入显色剂μ,再加入显色剂μ,轻轻震荡混匀,37℃避光显色分钟。 10. 终止:每孔加终止液μ,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零,波长依序测量各孔的吸光度(值)。 测定应在加终止液后分钟以
内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板
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条应装入密封袋中保存。
.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本值大于
标准品孔第一孔的值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(××)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 .底物请避光保存。
.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. .所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 .本试剂不同批号组分不得混用。
. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 保存条件及有效期 .试剂盒保存:;-8℃。 .有效期:个月
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