肺纤维化体外模型建立方法的研究进展

􀅰综述􀅰

肺纤维化体外模型建立方法的研究进展

卫杨林１ꎬ２ꎬ殷子斐２ꎬ李霞２

(１上海中医药大学ꎬ上海２０１２０３ꎻ２第二军医大学长海医院)

　　摘要:目前ꎬ有多种关于肺纤维化体外模型的建立方法ꎮ大量研究结果显示ꎬ体外物理环境中的博来霉素、百小板源性生长因子、胰岛素样生长因子ꎬ均可能是肺纤维化体外模型的诱导物质ꎮ　　ｄｏｉ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００２￣２６６Ｘ.２０１８.２２.０３０

　　关键词:肺纤维化ꎻ细胞因子ꎻ病因刺激造模法ꎻ细胞因子干预造模法ꎻ体外研究　　中图分类号:Ｒ５６３.１　　文献标志码:Ａ　　文章编号:１００２￣２６６Ｘ(２０１８)２２￣００９３￣０４

草枯、二氧化硅、碳纳米管、粉尘螨ꎬ以及体内细胞因子中的转化生长因子￣β１、结缔组织生长因子、血管紧张素Ⅱ、血

　　肺纤维化是一类慢性进行性加重疾病ꎬ可导致患者的肺功能逐渐恶化ꎮ其实质是肺泡损伤ꎬ肺组织过度修复、重塑的过程ꎬ肺脏组织实质细胞减少ꎬ纤维结缔组织异常增多的疾病ꎮ肺纤维化患者的中位生存期仅２~５年ꎬ５年存活率只有２０％[１]ꎮ目前临床上常用的治疗方法虽然有戒烟、氧疗、机械通气等非药物治疗方法ꎬ以及吡非尼酮、尼达尼布、Ｎ￣乙酰半胱氨酸等抗纤维化、抗氧化药物ꎬ但疗效欠能提高患者生存率ꎬ但毕竟供体有限ꎬ且治疗费用昂贵ꎬ难以惠及更多患者ꎮ因此ꎬ积极深入开展肺纤维化的相关研究ꎬ提高肺纤维化的诊断和治疗水平迫在眉睫ꎮ与体内研究相比ꎬ体外研究具有简便迅速、条件易控制等优点ꎬ在疾病研究和药物研发中应用较广ꎮ目前ꎬ肺纤维化的体外研究主要是结合肺纤维化的病因和发病机制ꎬ对细胞系进行适当干预ꎬ模拟肺纤维化的病理过程ꎮ因细胞种类、干预方式的不同ꎬ目前有多种关于肺纤维化体外模型的建立方法ꎮ现就近年来应用较为广泛的肺纤维化的体外模型的建立方法进行系统综述ꎮ１　病因刺激造模法

　　随着对肺纤维化研究的深入ꎬ现已证实部分肺纤维化的发生有一定的病因ꎬ大多数由于外界物质的接触所导致ꎬ如暴露于药物、尘埃、化学试剂等ꎮ因此ꎬ可以利用这些病因作为细胞模型的诱导剂ꎬ建

基金项目:国家自然科学基金资助项目(８１４０３３８５)ꎻ上海市卫生与计划生育委员会中医特色诊疗技术提升项目(Ｚｙｊｘ￣２０１７０２８)ꎮ通信作者:李霞(Ｅ￣ｍａｉｌ:ｃｃｎｊｋｃ＠１６３.ｃｏｍ)

１.１　博来霉素(ＢＬＭ)　ＢＬＭ是一种抗肿瘤药物ꎬ但可导致细胞外基质(ＥＣＭ)沉积和炎性反应ꎬ促进肺纤维化形成ꎬ常用来作为动物肺纤维化模型的诱导剂[３]ꎮＤｅｌｌａＬａｔｔａ等[４]取少量肺组织经消化得到的原代肺纤维细胞ꎬ用不同浓度范围ＢＬＭ(０~３.５μｇ/ｍＬ)刺激４ｈ后ꎬ发现原代肺纤维细胞中血管炎Ｈｕａｎｇ等[５]用ＢＬＭ(３ｍＵ/ｍＬ)刺激人肺成纤维细胞２４、４８、７２ｈ后ꎬ发现ＴＧＦ￣β１ｍＲＮＡ表达量分别是空白组的６０、４０、２０倍ꎻ而预先用ＴＧＦ￣β１抗体处理１ｈ后再给予ＢＬＭ刺激ꎬ发现此时纤连蛋白(ＦＮ)、α平滑肌肌动蛋白(α￣ＳＭＡ)的蛋白和基因水１.２　百草枯(ＰＱ)　ＰＱ是一种高毒性除草剂ꎬ肺是其作用的主要靶器官ꎬ表现为急性肺泡炎和肺间质纤维化的迅速形成ꎬ从而能诱导人和动物形成肺纤维化疾病ꎬ其主要是通过上皮－间质转化(ＥＭＴ)引起的ꎬ并且有ＴＧＦ￣β/Ｓｍａｄ信号通路的参与[６]ꎮ高烨等[７]将ＰＱ(５０μｍｏｌ/Ｌ)与人肺上皮细胞ＨＰＡ￣ＥｐｉＣ共同孵育２４ｈ后ꎬ发现细胞从鹅卵石样上皮形态转变为间质样梭形形态ꎬ上皮性标志物Ｅ￣ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白的表达下调ꎬ而间质性标记物Ｎ钙黏着蛋白(Ｎ￣ｃａｄｈｅｒｉｎ)、基质金属蛋白酶２(ＭＭＰ￣２)和１.３　二氧化硅(ＳｉＯ２)　ＶｉｍｅｎｔｉｎｍＲＮＡ表达量均增加ꎮ

ＳｉＯ２粉尘是一种工业粉

９３

平与空白组基本相同ꎮ

立肺纤维化的体外模型ꎮ

佳[２]ꎮ肺移植是肺纤维化终末期的惟一治疗途径ꎬ

症标志物穿透素３和ＴＮＦ￣αｍＲＮＡ表达量均增加ꎮ

尘ꎬ长期吸入会造成严重的肺损伤ꎮ当肺中巨噬细胞吞噬大量粉尘后ꎬ会分泌相关活性因子ꎬ产生其他

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炎症反应促进矽肺的形成ꎮＬｉａｎｇ等[８]先用ＳｉＯ２

成３个方面参与其中[１４]ꎮ因此ꎬ可以借助这些细胞２.１　ＴＧＦ￣β　

因子ꎬ对细胞进行干预ꎬ建立肺纤维化的体外模型ꎮ

ＴＧＦ￣β是目前公认的致纤维化作用

２４ｈ后用其上清液来培养肺泡Ⅱ型上皮细胞ＲＬＥ￣６ＴＮꎬ２４ｈ后检测发现Ｅ￣ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白表达下调了６０％ꎬ而Ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ＦＮ和Ⅰ型胶原(ＣｏｌⅠ)蛋白表达都明显上调ꎬ分别升高了１.２、１.２、１.３倍ꎻ同时也发现细胞迁移活性增强ꎬ表现出纤维母细胞样形态ꎮ郝小惠等[９]用ＳｉＯ２(５０μｇ/ｍＬ)混悬液刺激人肺腺癌细胞Ａ５４９细胞ꎬ结果显示水通道蛋￣１(ＡＱＰ￣１)ＡＱＰ￣１蛋白表达也上调并在６ｈ时达到峰值ꎮ

(２５０μｇ/ｍＬ)刺激小鼠巨噬细胞细胞ＲＡＷ２６４.７ꎬ

最强的细胞因子ꎬ亚型中又以ＴＧＦ￣β１致纤维化能力最强[１５]ꎮＬｉ等[１６]用ＴＧＦ￣β１(５ｎｇ/ｍＬ)刺激人胚ＳＭＡ蛋白表达均较空白组明显增加ꎻ此时ꎬ细胞形态上也呈现出相应的纤维化特征ꎮ此外ꎬＴＧＦ￣β１还在同等剂量ＴＧＦ￣β１刺激下的人胚肺成纤维细胞ＨＥＬＦꎬ其形态呈密集的团丛状分布且数量增多、体成纤维细胞ＷＩ３８４８ｈ后ꎬ发现β￣ｃａｔｅｎｉｎ、ＦＮ和α￣

ｍＲＮＡ在２ｈ达到高峰(为空白组的３.８５倍)ꎻ具有强烈的促进细胞增殖作用ꎮ骆亚莉等[１７]发现ꎬ

１.米材料４　

碳纳米管ꎬ可分为单壁碳纳米管(ＣＮＴ)　ＣＮＴ(ＳＷＣＮＴ)是一种新型碳质纳

和多壁碳纳米管(ＭＷＣＮＴ)ꎬ对体内的毒性主要为肺部炎症和纤维化ꎮ肺内ＣＮＴ的持续存在会发起一种早期炎症反应ꎬ其特征是产生趋化因子诱导肺纤维细胞的慢性活化βꎬ分泌成纤维的生长因子如转化生长因子ＥＣＭ(１(ＴＧＦ￣β１)、血小板源性生长因子(ＰＤＧＦ)ꎬ加重性纤维化主要为胶原蛋白[１０]ｍＬ)ꎮＷａｎｇ等、[１１]纤维蛋白用ＭＷＣＮＴ(１５)沉积ꎬ导致渐进~６０μｇ/发现细胞特异性蛋白刺激鼠胚胎成纤维细胞￣１(ＦＳＰ￣１)、α￣ＳＭＡＮＩＨ/３Ｔ３ꎬ４８和ｈⅢ后检测型胶原(ＣｏｌⅢ)蛋白均有上升趋势ꎬ并呈剂量依赖ꎻ剂量为α￣ＳＭＡ、Ｃｏｌ３０μｇ/ｍＬ２.１.５、２.２倍ꎮ

Ⅲ时成纤维细胞特异性蛋白ｍＲＮＡ表达量分别是空１(白ＦＳＰ￣１)、组的２、

能够诱发肺上皮细胞和巨噬细胞分泌炎症相关因５　粉尘螨　粉尘螨粗提物是体外过敏原刺激物ꎬ子ꎬ如ＩＬ￣６等诱导肺纤维化的形成ꎮ已有研究[１２]发现ꎬＩＬ￣６在纤维结缔组织和平滑肌增生过程中发挥重要的作用ꎬ可促进胶原蛋白聚集和成纤维细胞的增殖ꎬ抑制ＥＣＭ降解ꎮ陈诗皓等[１３]在培养原代小鼠固有淋巴样２型细胞ＩＬＣ２中加入１０μｇ/ｍＬ的粉尘螨粗提物ꎬ在２４、３６、４８ｈ时收集细胞上清液进行检测ꎬ结果发现其ＩＬ￣６水平分别是空白组１、２、３倍ꎻ并且ＩＬ￣６ｍＲＮＡ的含量也逐渐升高ꎬ分别是空白组的５、１０、１５倍ꎬ呈现一定的时间依赖性ꎮ２　　明的肺纤维化　细胞因子干预造模法

无论是病因明确的肺纤维化ꎬ其病理机制主要为成纤维细胞异常ꎬ还是其他病因不增殖转型和ＥＣＭ大量沉积ꎮ目前研究已经证实ꎬ肺纤维化的进程离不开细胞因子的介导ꎬ这些细胞因子包括ＴＧＦ￣β张素Ⅱ(ＡｎｇⅡ)１、结缔组织生长因子和ＰＤＧＦ等ꎬ它们主要从促进纤维(ＣＴＧＦ)、血管紧化形成、参与局部损伤和炎症反应及抑制纤维化形９４

２.积增大２　ＣＴＧＦ　

、胞质丰富ＣＴＧＦꎮ

接下游介质ꎬ已被证实在肺是ＴＧＦ￣β、肾脏和肝脏的纤维化过１致纤维化作用的直

程中发挥了作用ꎬ可导致胶原蛋白过度沉积ꎬ是重要的促纤维化因子ꎬ也是肺纤维化预后标记物[１８]晓燕等[１９]用ＣＴＧＦ(２０ｎｇ/ｍＬ)刺激人胚肺成纤维ꎮ黄细胞α￣ＳＭＡＨＦＬ￣Ⅰ２４表达量为空白组的ｈꎬ发现细胞向肌成纤维细胞转化抑制剂后４倍ꎬꎮꎬ发现此时的细胞增而Ｈｕａｎｇ等[２０]在此基础上加入ＣＴＧＦ殖和迁移能力大幅度下降ꎬＥＣＭ蛋白表达减少ꎬ但在ＴＧＦ￣β１的配合下ꎬ却又促进了肺纤维化的发展进程２.ꎮ

醛固酮系统的组成部分３　ＡｎｇⅡ　

ＡｎｇⅡ是血管肾素ꎬ既是纤维增生的中介反应－血管紧张素－

物ꎬ也是纤维化的重要调控因子[２１]用ＢＬＭ诱导的严重肺纤维化和弥漫性肺部炎症小ꎮＨａｏ等[２２]在鼠中发现ꎬ肺组织中ＡｎｇⅡ、ＩＬ￣６、ＴＧＦ￣β达量分别升高了３、８、２倍ꎬ提示ＡｎｇⅡ是一种强有１ｍＲＮＡ表力的诱导因子ꎬ可通过ＴＧＦ￣β的自分泌ꎬ诱导肺泡上皮细胞的凋亡ꎬ激活成纤维细胞促进胶原蛋白产生和Ｌ)刺激ＥＣＭＭＲＣ￣５合成ꎮ细胞可明显增加细胞胶原生成梁海海等[２３]发现ꎬＡｎｇⅡ(１μｍｏｌꎻ并通

/过２.α￣ＳＭＡ染色证实在纤维化早中期ꎬ细胞向肌成纤维细胞的转化ꎬＰＤＧＦ可协调ＴＧＦ￣

ꎮβ原１４　间接刺激成纤维细胞增殖ＰＤＧＦ　

、转移和黏附ꎬ调节胶、ＥＣＭ沉积和降解ꎬ在肺纤维化性疾病发病机制中发挥越来越重要的作用[２４]ＰＤＧＦ(１０患者原代肺成纤维细胞和正常肺组织细胞ｎｇ/ｍＬ)分别刺激特发性肺纤维化ꎮＨｏｓｔｅｔｔｌｅｒ等[２５]４８(ｈＩＰＦ)用后ꎬ

发现两种细胞增殖效应接近１００％ꎮ王志勇等[２６]以人肺癌细胞Ａ５４９为研究对象ꎬ发现加入ＰＤＧＦ抗体(２５ｍｇ/Ｌ)后ꎬ可显著加强细胞ＭＭＰ￣９的表达水平２.５　ꎬ并且可抑制细胞生长胰岛素样生长因子ꎮ

Ⅰ(ＩＧＦ￣Ⅰ)　ＩＧＦ￣Ⅰ是一

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类细胞增殖调控因子ꎬ在细胞的分化、增殖、生长发育和血管新生中具有重要的作用ꎬ同时也是引起肺泡炎症和肺间质纤维化的重要因子[２７]ꎮＨｕｎｇ等[２８]用ＩＧＦ￣Ⅰ(１００ｎｇ/ｍＬ)刺激小鼠肺成纤维细胞ＭＬＦꎬ２４ｈ后检测发现ＣｏｌⅠ、ＣｏｌⅢｍＲＮＡ表达量均升高ꎬ分别是空白组的１.５、１.７倍ꎻα￣ＳＭＡ、ＣｏｌⅠ、ＣｏｌⅢ的蛋白含量分别是空白组１.３、２、１.６倍ꎮ３　总结与展望

　　随着肺纤维化机制研究的不断完善以及体外造ａｆｔｅｒｂｌｅｏｍｙｃｉｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｉｎｍｉｃｅ:Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎｏｆａｎａｃｃｕｒａｔｅｎｏｒｍａｌ￣ｖｉｔｒｏｍｏｄｅｌ[Ｊ].ＩｎｔＪＢｉｏｃｈｅｍＣｅｌｌＢｉｏｌꎬ２０１７ꎬ８８(２):１４５￣１５４.

ｉｚａｔｉｏｎｓｔｒａｔｅｇｙｆｏｒｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｉｎａｎｅｘ￣ｖｉｖｏａｎｄｉｎ￣[５]ＨｕａｎｇＬＳꎬＢｅｒｄｙｓｈｅｖＥꎬＭａｔｈｅｗＢꎬｅｔａｌ.Ｔａｒｇｅｔｉｎｇｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ

ｋｉｎａｓｅ１ａｔｔｅｎｕａｔｅｓｂｌｅｏｍｙｃｉｎ￣ｉｎｄｕｃｅｄｐｕｌｍｏｎａｒｙｆｉｂｒｏｓｉｓ[Ｊ].ＦａｓｅｂＪꎬ２０１３ꎬ２７(４):１７４９￣１７６０.

[６]ＺｈｕＹꎬＴａｎＪꎬＸｉｅＨꎬｅｔａｌ.ＨＩＦ￣１ａｌｐｈａｒｅｇｕｌａｔｅｓＥＭＴｖｉａｔｈｅ

Ｓｎａｉｌａｎｄｂｅｔａ￣ｃａｔｅｎｉｎｐａｔｈｗａｙｓｉｎｐａｒａｑｕａｔｐｏｉｓｏｎｉｎｇ￣ｉｎｄｕｃｅｄｅａｒ￣ｌｙｐｕｌｍｏｎａｒｙｆｉｂｒｏｓｉｓ[Ｊ].ＪＣｅｌｌＭｏｌＭｅｄꎬ２０１６ꎬ２０(４):６８８￣

模技术的发展ꎬ目前已经有多种造模方法ꎮ除了以

[７]高烨ꎬ赵娜ꎬ李晓青ꎬ等.百草枯诱导肺上皮细胞上皮间质转化

６９７.

促进肺纤维化[Ｊ].临床和实验医学杂志ꎬ２０１４ꎬ１３(１８):１４９１￣

上报道的常用的细胞模型方法外ꎬ还有用胆汁刺激酸肺泡上皮细胞、免疫抑制剂干预鼠胚胎成纤维细胞、石棉刺激肺泡巨噬细胞等[２９ꎬ３０]方法ꎮ研究者可根据具体的实验条件、细胞来源以及研究需要灵活地选择ꎮ

虽然肺纤维化的体外模型的方法多种多样ꎬ但目前关于肺纤维化建立方法的金标准尚未统一ꎮ目前常用的细胞有胚胎肺成纤维细胞、肺泡上皮细胞、肺成纤维细胞等ꎬ干预方式有病因和细胞因子两大类ꎬ常用的鉴定肺纤维化的方法为观察细胞形态Ⅰ、、测量胶原含量、以及检测ＴＧＦ￣β１、Ｃｏｌ然而Ｃｏｌꎬ同一种细胞对不同干预方式的反应是不一Ⅲ、α￣ＳＭＡ、Ｅ￣ｃａｄｈｅｒｉｎ、Ｖｉｍｅｎｔｉｎ等指标ꎮ样的ꎬ究竟采用哪种细胞接受什么样的干预刺激ꎬ

并用何种指标来鉴定肺纤维化更具有代表性ꎬ可以作为肺纤维化体外模型的金标准ꎬ目前尚未明确ꎮ另外ꎬ还需特别指出的是ꎬ目前使用的肺纤维化体外模型建立方法大都使用单种干预方式对细胞进行刺激ꎮ然而ꎬ肺纤维化是个复杂的病理过程ꎬ需要借助多种细胞、多种炎症因子进行参与ꎮ因此ꎬ在目前的工作基础上ꎬ如何寻求多种体外模型联合作用ꎬ才能建立更加贴近临床的肺纤维化体外模型也是值得思考的问题ꎮ相信随着现代科学技术的进步ꎬ理想而成熟的肺纤维化体外模型会逐渐建立起来ꎬ从而为肺纤维化疾病的诊断和治疗提供更加有效的支持ꎮ参考文献:

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ＬｉａｎｇｐｕｌｍｏｎａｒｙＤꎬＷａｎｇｂｅｔａ/ＳｍａｄｆｉｂｒｏｓｉｓＹꎬａｎｄＢＭＰ￣７ｔｈｒｏｕｇｈＺｈｕＺꎬ/Ｓｍａｄｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｅｔａｌ.ＢＭＰ￣７ｓｉｇｎａｌｉｎｇｏｆｔｈｅａｔｔｅｎｕａｔｅｄｓｉｌｉｃａ￣ｉｎｄｕｃｅｄ

ｐａｔｈｗａｙｂａｌａｎｃｅ[Ｊ].ｂｅｔｗｅｅｎＣｈｅｍＴＧＦ￣[９]ＩｎｔｅｒａｃｔꎬＢｉｏｌ郝小惠２０１６ꎬ２４３(５):７２￣８１.

白￣１表达ꎬ郭志义:体外研究ꎬ张芳[ꎬＪ].等.环境与职业医学二氧化硅刺激Ａ５４９ꎬ２０１５ꎬ３２细胞水通道蛋

(８):７９０￣

[１０]７９４.

ＤｏｎｇｐｒｏｆｉｌｉｎｇＪꎬＰｏｒｔｅｒｗａｌｌｅｄｏｆｒａｐｉｄ￣ｏｎｓｅｔＤＷꎬＢａｔｔｅｌｉｆｉｂｒｏｓｉｓＬＡꎬａｎｄｅｔｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎａｌ.Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｎｄｍｏｌｅｃｕｌａｒ

６３３.

ｃａｒｂｏｎｎａｎｏｔｕｂｅｓ[Ｊ].ＡｒｃｈＴｏｘｉｃｏｌꎬ２０１５ꎬ８９ｉｎｄｕｃｅｄ(４ｂｙ):６２１￣

ｍｕｌｔｉ￣[１１]ＷａｎｇｒｅｃｔｌｙＰꎬＷａｎｇＹꎬＮｉｅｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｓｐｒｏｍｏｔｅＸꎬｅｔａｌ.Ｍｕｌｔｉｗａｌｌｃａｒｂｏｎｎａｎｏｔｕｂｅｓｄｉ￣

ｔｈｒｏｕｇｈｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ￣ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｔｈｅｏｆｔｈｅａｎｄＴＧＦ￣ｂｅｔａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ￣ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｐａｔｈｗａｙ[Ｊ].Ｓｍａｌｌꎬ２０１５ꎬ１１(４):４４６￣４５５.

ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ/Ｓｍａｄｓｉｇｎａｌｉｎｇ[１２]ＬｅＴＴꎬｓｉｇｎａｌｉｎｇＫａｒｍｏｕｔｙ￣ＱｕｉｎｔａｎａａｔｔｅｎｕａｔｅｓＨꎬｐｕｌｍｏｎａｒｙＭｅｌｉｃｏｆｆｆｉｂｒｏｓｉｓＥꎬｅｔａｌ.[ＪＢｌｏｃｋａｄｅ].ＪＩｍｍｕｎｏｌꎬ

ｏｆＩＬ￣６

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ＨＬＥ[Ｊ].ＷｏｒｌｄＪＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌꎬｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｉｎ２００５ꎬ１１(１５):２２６４￣２２６８.ｔｈｅｈｕｍａｎｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｃｅｌｌｌｉｎｅ[１６]Ｌｉｂｅｔａ￣ｃａｔｅｎｉｎＪꎬＷａｎｇＧꎬＳｕｎＸ.Ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｂｅｔａｒｅｇｕｌａｔｅｓ

[１７]ｐｅｎｄｅｎｔ骆亚莉ｐａｔｈｗａｙ[Ｊ].ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎＩｎｔｉｎＪｌｕｎｇＭｏｌｆｉｂｒｏｂｌａｓｔＭｅｄꎬ２０１４ꎬ３４(５):１２１９￣１２２４.ｔｈｒｏｕｇｈＮＦ￣ｋａｐｐａＢｄｅ￣β诱导的ꎬ安方玉ＨＥＬＦꎬ李能莲表达α￣ＳＭＡ、ＣＴＧＦꎬ等.当归多糖及小分子提取物对的影响[Ｊ].中药药理与临ＴＧＦ￣

床１ꎬ２０１７ꎬ３３(３):７３￣７８.

[１８]ＺｈｕｉｎｄｕｃｅｄＢꎬＭａｔｈｅｐｕｌｍｏｎａｒｙＡＱꎬＹａｎｇｆｉｂｒｏｓｉｓＬꎬｅｔａｌ.Ａｔｏｒｖａｓｔａｔｉｎａｔｔｅｎｕａｔｅｓｂｌｅｏｍｙｃｉｎ￣

２０１３ꎬ１４(１２):２４４７６￣２４４９１.

ＣＴＧＦ(ＣＣＮ２)/ＥＲＫｓｉｇｎａｌｉｎｇｖｉａｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇｐａｔｈｗａｙ[ｉＮＯＳＪ].ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎＩｎｔＪＭｏｌＳｃｉꎬ

ａｎｄ[１９]黄晓燕胚肺成纤维细胞转分化的研究ꎬ廉姜芳ꎬ金丽华ꎬ等.ＪＡＫ￣ＳＴＡＴ[Ｊ].医学研究杂志通路参与ＣＴＧＦꎬ２０１２ꎬ４１诱导人

(８):８８￣９１.

９５

山东医药２０１８年第５８卷第２２期

肺水清除相关离子通道的研究进展

罗园ꎬ张会然ꎬ苏雅囡ꎬ吴国峰ꎬ阎锡新(河北医科大学第二医院ꎬ石家庄０５００００)

　　摘要:离子通道为存在于细胞膜内的蛋白结构ꎬ可以介导水及离子的跨细胞转运ꎮ肺泡上皮细胞由多种离子通道构成ꎬ这些通道对于维持肺泡内液体清除起到关键作用ꎮ因此ꎬ离子通道功能受损会导致肺泡内液体增多ꎬ从而形成肺水影响肺内气体交换ꎬ进一步加重会进展至急性肺损伤及急性呼吸窘迫综合征ꎮ相关离子通道有钠离子通道、钾离子通道、非选择性阳离子通道、氯离子通道以及Ｎａ＋￣Ｋ＋￣ＡＴＰ酶ꎬ研究这些离子通道可能为肺水肿的治疗提供更好更新的方法ꎮ

　　关键词:离子通道ꎻ肺水清除ꎻ肺水肿ꎻ急性肺损伤ꎻ急性呼吸窘迫综合征　　ｄｏｉ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００２￣２６６Ｘ.２０１８.２２.０３１

　　中图分类号:Ｒ５６３　　文献标志码:Ａ　　文章编号:１００２￣２６６Ｘ(２０１８)２２￣００９６￣０４

　　目前ꎬ急性呼吸窘迫综合征(ＡＲＤＳ)仍是临床上危重患者严重的并发症和重要的死亡原因ꎬ其相关的病死率高达４０％ꎬ给社会和患者家庭带来了沉重的经济负担ꎮＡＲＤＳ主要病理改变为炎症反应引起肺泡毛细血管内膜损伤和毛细血管渗透性增加ꎬ造成弥漫性肺间质及肺泡水肿ꎬ导致急性低氧性呼吸功能不全[１]ꎮ肺水肿是ＡＲＤＳ病理进程中的核心环节ꎬ以往对肺水肿的形成机制研究较为广泛ꎬ但对于肺水肿的吸收、肺水清除环节研究较少ꎮ不同原

基金项目:国家自然科学基金资助项目(８１５０００５７)ꎮ

[２０]ＨｕａｎｇＭꎬＹａｎｇＨꎬＺｈｕＬꎬｅｔａｌ.Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｃｏｎｎｅｃｔｉｖｅｔｉｓｓｕｅ

ｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒａｔｔｅｎｕａｔｅｓｐａｒａｑｕａｔ￣ｉｎｄｕｃｅｄｌｕｎｇｆｉｂｒｏｓｉｓｉｎａｈｕｍａｎＭＲＣ￣５ｃｅｌｌｌｉｎｅ[Ｊ].ＥｎｖｉｒｏｎＴｏｘｉｃｏｌꎬ２０１６ꎬ３１(１１):１６２０￣１６２６.ｔｉｏｎｉｎｐｕｌｍｏｎａｒｙｆｉｂｒｏｓｉｓ[Ｊ].ＩｎｔＪＰｅｐｔꎬ２０１２ꎬ４４(３):４６５￣４６８.

因造成的急性肺损伤(ＡＬＩ)的病理生理特点之一是过度、持续的炎症反应伴随肺的渗透性水肿ꎮ有研究报道ꎬ一些离子通道参与了这些病理生理过程ꎬ包括钠离子通道、钾离子通道、非选择性阳离子通道、氯离子通道以及Ｎａ＋￣Ｋ＋￣ＡＴＰ酶等ꎮ现就肺水清除相关离子通道的研究进展进行综述ꎮ１　钠离子通道　

　　在肺水清除中ꎬ钠的主动转运扮演着重要的角色ꎮ通过位于肺泡上皮细胞顶部的钠通道ꎬ把钠从肺泡腔转运入细胞内ꎮ在肺泡上皮的顶端ꎬ有许多型钠离子通道ꎬ可分为阿米洛利敏感和非敏感型钠

[２６]王志勇ꎬ刘钊鸿ꎬ王炜ꎬ等.中和血小板源性生长因子对Ａ５４９

人肺癌细胞生长及迁移的影响[Ｊ].广东医学院学报ꎬ２０１６ꎬ３４(５):４７５￣４７９.

[２１]ＵｈａｌＢＤꎬＤａｎｇＭＴꎬＬｉＸꎬｅｔａｌ.Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎｏｇｅｎｇｅｎｅｔｒａｎｓｃｒｉｐ￣[２２]ＨａｏＹꎬＬｉｕＹ.ＯｓｔｈｏｌｅＡｌｌｅｖｉａｔｅｓＢｌｅｏｍｙｃｉｎ￣ＩｎｄｕｃｅｄＰｕｌｍｏｎａｒｙ

ＦｉｂｒｏｓｉｓｖｉａＭｏｄｕｌａｔｉｎｇＡｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ￣ＣｏｎｖｅｒｔｉｎｇＥｎｚｙｍｅ２/Ａｎｇｉｏ￣[Ｊ].ＢｉｏｌＰｈａｒｍＢｕｌｌꎬ２０１６ꎬ３９(４):４５７￣４６５.

ｔｅｎｓｉｎ￣(１￣７)ＡｘｉｓａｎｄＤｅｃｒｅａｓｉｎｇＩｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎＲｅｓｐｏｎｓｅｓｉｎＲａｔｓ[２３]梁海海ꎬ李天宇ꎬ解岩ꎬ等.Ｌｉｎ２８Ｂ/ｌｅｔ￣７ｄ环路调控成纤维细胞

１７５￣１８０.

[２７]ＶｅｒａｌｄｉＫＬꎬＦｅｇｈａｌｉ￣ＢｏｓｔｗｉｃｋＣＡ.Ｉｎｓｕｌｉｎ￣ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｂｉｎｄ￣

ｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎｓ￣３ａｎｄ￣５:ｃｅｎｔｒａｌｍｅｄｉａｔｏｒｓｏｆｆｉｂｒｏｓｉｓａｎｄｐｒｏｍｉｓｉｎｇ

[２８]ＨｕｎｇＣＦꎬＲｏｈａｎｉＭＧꎬＬｅｅＳＳꎬｅｔａｌ.ＲｏｌｅｏｆＩＧＦ￣１ｐａｔｈｗａｙｉｎ[２９]ＣｈｅｎＢꎬＹｏｕＷＪꎬＬｉｕＸＱꎬｅｔａｌ.Ｃｈｒｏｎｉｃｍｉｃｒｏａｓｐｉｒａｔｉｏｎｏｆｂｉｌｅ

[Ｊ].ＣｌｉｎＳｃｉ(Ｌｏｎｄ)ꎬ２０１７ꎬ１３１(１０):９５１￣９６３.

ｌｕｎｇｆｉｂｒｏｂｌａｓｔａｃｔｉｖａｔｉｏｎ[Ｊ].ＲｅｓｐｉｒＲｅｓꎬ２０１３ꎬ１４(１):１￣１２.

１４０￣１４５.

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ａｃｉｄｓｉｎｄｕｃｅｓｌｕｎｇｆｉｂｒｏｓｉｓｔｈｒｏｕｇｈｍｕｌｔｉｐｌｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｉｎｒａｔｓ

[２４]ＶｉｅｔｔｉＧꎬＬｉｓｏｎＤꎬｖａｎｄｅｎＢｒｕｌｅＳ.Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆｌｕｎｇｆｉｂｒｏｓｉｓ

ｉｎｄｕｃｅｄｂｙｃａｒｂｏｎｎａｎｏｔｕｂｅｓ:ｔｏｗａｒｄｓａｎＡｄｖｅｒｓｅＯｕｔｃｏｍｅＰａｔｈ￣ｗａｙ(ＡＯＰ)[Ｊ].ＰａｒｔＦｉｂｒｅＴｏｘｉｃｏｌꎬ２０１６ꎬ１３(６):１￣２３.

[３０]ＧｅｎｄｒｏｎＤＲꎬＬｅｍａｙＡＭꎬＬｅｃｏｕｒｓＰＢꎬｅｔａｌ.ＦＴＹ７２０ｐｒｏｍｏｔｅｓ

ｐｕｌｍｏｎａｒｙｆｉｂｒｏｓｉｓｗｈｅｎａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄｄｕｒｉｎｇｔｈｅｒｅｍｏｄｅｌｌｉｎｇｐｈａｓｅｆｏｌｌｏｗｉｎｇａｂｌｅｏｍｙｃｉｎ￣ｉｎｄｕｃｅｄｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙ[Ｊ].ＰｕｌｍＰｈａｒｍａｃｏｌＴ￣ｈｅｒꎬ２０１７ꎬ４４(２):５０￣５６.

(收稿日期:２０１８￣０１￣３０)

[２５]ＨｏｓｔｅｔｔｌｅｒＫＥꎬＺｈｏｎｇＪꎬＰａｐａｋｏｎｓｔａｎｔｉｎｏｕＥꎬｅｔａｌ.Ａｎｔｉ￣ｆｉｂｒｏｔｉｃ

ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｎｉｎｔｅｄａｎｉｂｉｎｌｕｎｇｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｉｄｉｏｐａｔｈｉｃｐｕｌｍｏｎａｒｙｆｉｂｒｏｓｉｓ[Ｊ].ＲｅｓｐｉｒＲｅｓꎬ２０１４ꎬ１５(１):１￣９.

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