藜麦皂甙的测定研究
渊1.山西卓世鸿基科技有限公司袁山西太原030031曰2.山西省农业科学院农产品加工研究所袁山西太原030031冤
任卓伟1袁倪文杰2袁刘森2摘要院用高氯酸比色法对藜麦中皂甙的测定进行了研究袁并且测定了水洗后藜麦皂甙的含量变化遥结果表明袁用
香草醛-高氯酸比色法测定藜麦中的皂甙含量是一种方便快捷尧结果稳定的方法遥测定藜麦皂甙选用齐墩果酸为标准品袁波长为560nm袁标准曲线方程为y＝0.1966x－0.0137袁并且R2显示在此范围内有良好的线性关系遥提取样品皂甙的条件为院提取液乙醇的体积分数为70%袁料液比为1∶30袁提取温度为50℃遥结果测定的藜麦皂甙含量为10.709mg/g袁水洗之后藜麦中皂甙含量有所减少袁清洗的次数越多袁藜麦中皂甙的含量越少袁清洗3次后藜麦中总皂甙含量由原来的10.709mg/g降低为6.077mg/g袁减少了43.25%遥并且水洗去除藜麦种皮中的皂甙占总去除皂甙的87%遥
关键词院藜麦曰皂甙曰含量测定曰比色法曰齐墩果酸中图分类号院S512.9文献标识码院A文章编号院1002-2481渊2015冤08-0932-04DeterminationofQuinoaSaponins
渊1.ShanxiZhuoshiHongjiScienceandTechnologyCo.Ltd.袁Taiyuan030031袁China曰
RENZhuo-wei1袁NIWen-jie2袁LIUSen2
2.InstituteofAgriculturalProductsProcessing袁ShanxiAcademyofAgriculturalSciences袁Taiyuan030031袁China冤Abstract院Thisarticlewithvanillin-perchloricacidcolorimetricmethodforthedeterminationofsaponinsinquinoawasstudiedandmeasuredchangesinthecontentofquinoasaponinsafterwashing.Theresultsshowedthatusingvanillin-perchloricacidcolorimetricsaponinsinquinoastablemethodwasaconvenientandquickresults.Quinoasaponinsdeterminationofoleanolicacidwaschosenasthestandard,wavelengthwas560nm,thestandardcurveequationwasy＝0.1966x－0.0137,andR2displayedwithinthisrangeagoodlinearrelationship.Conditionssaponinextractsampleswereethanolextractvolumefractionof70%,solid-liquidratioof1∶30,extractiontemperatureof50℃.Thequinoasaponinsdeterminationwas10.709mg/g,afterwashingquinoasaponincontentdecreased,themorecleaningthenumber,thelesssaponincontentofquinoa,andwashedthreetimesinquinoasaponinsoriginalcontentthe10.709mg/greducedto6.077mg/g,reducing4.632mg/g,accountingfor43.25%oftheoriginalcontent.Waterremovedthesaponinsintheseedcoat87%ofthetotalsaponinsaponins.Keywords院quinoa;saponin;contentdetermination;cdorimetry;oleanolicacid.com.cn. All Rights Reserved.methodfordeterminationofcontentof藜麦渊ChenopodiumquinoaWilld冤是一种有着悠久栽培历史的1年生双子叶植物[1]遥藜麦具有抗恶劣条件生长的特性袁被联合国国际粮农组织认定为非转基因营养食品[2]遥其原产于南美洲安第斯高原袁目前在美洲尧欧洲和非洲等国家均有种植[3]遥近影响袁藜麦种植开始起步袁但是很多相关研究工作尚未进行遥
藜麦种皮中含有很高的皂甙袁是藜麦中主要的抗营养物质[4]袁已有研究指出袁它会妨碍某些营养素的吸收[5]遥在传统食用与制作食物过程中袁通常先使用年来袁我国受国际上对于藜麦的研究与产业发展的
戊二烯途径生成袁齐墩果酸型尧商陆酸型等为常见类型袁糖苷配基主要为半乳糖阿拉伯糖与葡萄糖[7-8]遥
目前袁国内对藜麦皂甙的测定研究得很少袁本
水洗去除皂甙[6]遥藜麦皂甙主要为三萜皂甙袁通过异
试验用分光光度法对藜麦皂甙的测定进行研究袁并且测定了水洗之后藜麦中的皂甙变化袁旨在为以后对藜麦的后续研究提供理论依据遥
1材料和方法
1.1试验材料
本试验使用的试剂有香草醛尧无水乙醇尧冰醋
收稿日期院2015-04-22
作者简介院任卓伟渊1978-冤袁男袁山西静乐人袁助理研究员袁主要从事功能食品开发研究工作遥刘森为通信作者遥
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任卓伟等院藜麦皂甙的测定研究
酸尧高氯酸袁均为分析纯曰齐墩果酸标准品遥藜麦取为藜麦总质量渊g冤曰v为供试液取样体积渊mL冤遥自静乐县遥1.3.3.2料液比的确定
分别称取粉碎好的藜麦粉
1.2试验仪器
5份袁每份5g袁置于锥形瓶中袁分别按照料液比1∶分光光度计渊上海精科有限公司冤曰SHZ-B水浴10袁1∶20袁1∶30袁1∶40袁1∶50加入最佳的体积分恒温振荡器渊上海跃进医疗器械厂冤曰HH4数显恒数的乙醇水溶液袁50℃振荡提取24h袁抽滤得到滤温水浴锅渊常州国华有限公司冤遥液即为供试液样品液遥吸取供试液400滋L袁采取与1.3试验方法
标准液相同的方法测定其吸光度值遥根据标准曲线1.3.1标准液的配制[9-12]
由于藜麦皂甙为三萜皂
求出测定样品中皂甙的质量渊m冤袁按照公式求出藜甙袁因此袁选用齐墩果酸为标准品遥准确称取齐墩果麦中总皂甙含量遥确定出最佳的料液比遥酸标准品20mg袁加少量乙醇溶解后定容于20mL1.3.3.3提取温度的确定
分别称取粉碎好的藜麦
的容量瓶中袁制成1mg/mL标准溶液遥
粉5份袁每份5g袁置于锥形瓶中袁按照最佳料液比1.3.2标准曲线的绘制[13-16]用移液枪准确地吸取加入最佳的体积分数的乙醇水溶液袁分别在20袁30袁0袁50袁100袁200袁400滋L的标准溶液袁分别置于干燥40袁50袁60℃温度条件下振荡提取24h袁抽滤得到滤的蒸发皿中袁60℃水浴蒸干袁取出曰依次加入5%香液即为供试液样品液遥吸取供试液400滋L袁采取与草醛冰醋酸溶液0.8mL和高氯酸3.2mL袁摇匀袁于标准液相同的方法测定其吸光度值遥根据标准曲线0℃水浴保温10min袁取出曰用冰水冷却10min袁加求出测定样品中皂甙的质量渊m冤袁按照公式求出藜入20mL冰醋酸袁摇匀袁静置15min遥选取400滋L麦中总皂甙含量遥确定出最佳的提取温度遥的标准品于可见分光光度计540～700nm处进行1.3.4水洗对藜麦皂甙的影响
分别准确称取藜
扫描袁选定最大吸收波长为测定波长遥在最大吸收麦样品4份袁每份10g遥将其中3份分别用50mL波长处测定各标准品的吸光度A袁以A值为横坐的水清洗1次袁2次和3次袁然后晾干遥
标袁以相应齐墩果酸标准品质量渊mg冤为纵坐标袁绘每份样品各取出5g袁进行粉碎袁把藜麦粉分别制标准曲线遥
置于锥形瓶中袁按照料液比1∶30加入70%乙醇1.3.3供试样品的制备条件确定[17-21]水溶液袁50℃振荡提取24h袁抽滤得到滤液为供试1.3.3.1
乙醇体积分数的确定
将一定量的藜麦
液袁进行藜麦皂甙含量的测定遥
种子粉碎成藜麦粉袁分别称取藜麦粉5份袁每份5g袁将每份剩余的5g藜麦袁分别直接置于锥形瓶置于锥形瓶中袁按照料液比1∶30分别加入50%袁中袁按照料液比1∶30加入70%乙醇水溶液袁50℃60%袁70%袁80%袁90%的乙醇水溶液袁50℃振荡提取振荡提取24h袁抽滤得到滤液为供试液袁进行藜麦24h袁抽滤得到滤液即为供试液样品液遥吸取供试皂甙含量的测定遥
液400滋L袁采取与标准液相同的方法测定其吸光度值遥根据标准曲线求出测定样品中皂甙的质量渊m冤袁2结果与分析
按照公式求出藜麦中总皂甙含量遥确定出最佳的乙2.1检测波长的测定
醇体积分数遥
由表1可知袁齐墩果酸标准品在540～700nm皂甙含量渊mg/g冤＝mV/Mv遥其中袁m为供试液样处的最大吸收波长为560nm袁因此袁选用560nm为品中总皂甙质量渊mg冤曰V为供试液总体积渊mL冤曰M
检测波长遥
表1齐墩果酸标准品不同波长的吸光度值
波长/nm540560580600620640660680700A
2.123
2.227
2.112
2.008
1.899
1.312
0.869
0.685
0.586
2.2标准曲线的绘制
表2可以看出袁当乙醇的体积分数从50%提高到通过Excel数据处理得到的回归方程为院y＝70%时袁提取出的皂甙含量逐渐增加曰当乙醇的体0.1966x－0.0137袁并且R2显示在此范围内有良好积分数从70%提高到90%时袁提取出的皂甙含量逐的线性关系渊图1冤遥
渐减少遥当乙醇的体积分数为70%时袁提取的皂甙2.3供试液的制备条件确定
含量最大袁为10.334mg/g袁因此袁提取剂乙醇的最佳2.3.1乙醇体积分数对皂甙提取效果的影响
从
体积分数为70%遥
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表2不同乙醇体积分数对皂甙提取效果的影响
乙醇体积分数/%50
60708090皂甙含量渊/mg/g冤
7.7379.028
10.334
9.266
8.156
2.3.2料液比对皂甙提取效果的影响由图2可
知袁当料液比1∶10～1∶30时袁提取出的皂甙含量逐渐增加曰当料液比1∶30～1∶50时袁提取出的皂甙含量逐渐减少遥当料液比为1∶30时袁提取的皂甙含量最大袁为10.331mg/g遥因此袁提取藜麦皂甙的最佳料液比为1∶30遥
2.3.3提取温度对皂甙效果的影响
从图3可以
看出袁随着温度的升高袁皂甙的提取量也随着增大袁当温度小于50℃时袁皂甙的提取量增加得较快遥当温度为50℃时袁提取出的皂甙含量为10.341mg/g袁60℃提取出的皂甙含量为10.345mg/g袁说明大于50℃时袁提取出的皂甙含量增加不多遥因此袁选用50℃为最佳提取温度遥
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2.4水洗对藜麦中皂甙含量的影响2.4.1
水洗对藜麦粉中皂甙含量的影响
从图4
可以看出袁藜麦未经清洗袁粉碎后测得的皂甙含量较高袁为10.709mg/g遥清洗1次后皂甙含量显著减少袁清洗次数越多袁其皂甙含量越少袁清洗3次后藜麦粉中的皂甙含量为6.077mg/g袁减少了4.632mg/g袁减少了43.25%遥清洗3次与清洗2次的总皂甙含量变化不大袁所以袁清洗3次就可以去除大部分皂甙了遥
2.4.2水洗对藜麦种子中皂甙含量的影响
由图5
可知袁未清洗的藜麦种子中总皂甙含量最高袁为7.284mg/g袁清洗之后皂甙含量会减少袁因此袁清洗可以去除藜麦中的部分皂甙遥随着清洗次数的增加袁藜麦中的总皂甙含量在逐渐地降低袁清洗3次后总皂甙含量降低为3.266mg/g袁减少了4.018mg/g遥清洗3次与清洗2次的总皂甙含量变化不大袁仅减少了0.159mg/g袁所以袁清洗3次就可以去除大部分皂甙了遥
2.4.3藜麦粉与藜麦种子中皂甙含量的比较从
图4袁5可以看出袁未清洗的藜麦种子的皂甙含量占未清洗的藜麦粉中的皂甙含量的68%袁说明藜麦中的皂甙大部分存在于藜麦的种皮上袁种子内仅为32%遥水洗后种皮中减少的皂甙含量占总皂甙减少的87%袁说明水洗主要去除的是种子表皮中的皂甙袁去除了55%的皂甙遥
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3结论与讨论
咱6暂SbutionpargSofGpla袁LightntsaponinsME袁va[Jn].JSotaurnadenlJof.BiologEthnophaicalrmactivitiesacology袁a2004nddis袁94tri-院
本研究采用香草醛-高氯酸比色法测定藜麦219-243.
中的皂甙含量袁该方法测定皂甙含量方便快捷尧结果咱7暂KuljasaponinsnabhafrogamvadChenopodiumT袁WinkM.BiologquinoaicaWilldlactivities[J].PhytoandchemchemistryRevo袁f
稳定遥本研究选用齐墩果酸为标准品袁检测波长为2009袁8渊2冤院473-490.
560nm袁样品皂甙的提取条件院提取液乙醇体积分咱8暂Kulja数为70%袁料液比为1∶30袁提取温度为50℃遥之后penenabhasaponinsgavadfromT袁ChenopodiumThongphasukquinoaP袁ChamWilld[Julitrat].WPhyto袁etchemal.Triteistryr-袁
就可以利用标准方程和公式求出藜麦中皂甙含量遥2008袁69渊9冤院1919-1926.
本试验还对水洗后藜麦中皂甙含量进行了测定袁结咱9暂吴[J].红医袁学梁争鸣恒袁刘永袁2003红袁袁24等渊.5山冤院茱萸430-总432.皂苷的提取分离与含量测定
果表明袁水洗可以有效地减少藜麦的皂甙含量袁并且清洗的次数越多袁藜麦中皂甙的含量越少袁清洗咱10暂院学高丽报萍袁袁2002刘华袁袁19封渊云3冤芳院171-.人参总174.皂苷的含量测定[J].浙江工程学3次后藜麦中总皂甙含量由原来的10.709mg/g降咱11暂低为6.077mg/g袁减少了4.632mg/g袁减少了药黄俊斌袁2001.袁黄12芪渊5注冤院射394-液中395.黄芪总皂苷的含量测定[J].时珍国医国43.25%遥并且通过测定藜麦种皮中的皂甙发现袁藜咱12暂2001董怀袁海26袁渊谷3冤文院57-英.59.
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