小鼠淋巴细胞的分离培养
一、血液中淋巴细胞的分离:
1在1.5ML离心管中加入淋巴细胞分离液0.7ML;
2眼部采集小鼠的抗凝血,抗凝剂20%.。
3轻轻将血液加入淋巴细胞分离液的表面,立即以2000—2500转/分离心10MIN。
4小心吸取上层细胞,转移至另一1.5ML离心管中,再用HANK’S悬浮至1.5ML,再离心,去上清,再悬浮,等待分型用。
二、鼠脾脏中淋巴细胞的分离:
1无菌采集鼠的脾脏,且灭菌注射器的弯针头轻轻扎取,尽可能使单个细胞分离,再分别用4层灭菌纱布过滤2次。
2将滤液小心加入淋巴细胞分离液中。离心。
3 吸取上层淋巴细胞,HANK‘S液洗涤2次(尽可能去除淋巴细胞分离液)。
4加入1640培养液进行培养。、
*淋巴细胞分离液不低于全部液体的50%
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