三大洋深海沉积物样品可培养真菌多样性研究

第３４卷第１期　应用海洋学学报　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｏｃｅａｎｏｇｒａｐｈｙ　Ｖｏ１．３４．Ｎｏ．１　２０１５年２月　Ｆｅｂ．，２０１５　三大洋深海沉积物样品可培养真菌多样性研究　徐　炜，李广伟，黄翔玲，骆祝华　（国家海洋局第三海洋研究所、国家海洋局海洋生物遗传资源重点实验室，福建厦门３６１００５）　摘要：深海真菌是深海微生物的重要组成之一，在深海环境生态系统中起着非常重要的作用，但目　前人们对于深海沉积物中的真菌群落多样性关注较少．本研究对来自东太平洋、南大西洋和西南印　度洋（三大洋）的１５个沉积物样品进行真菌的分离培养，共获得１７５株真菌，包括９３株酵母菌和　８２株丝状真菌．基于形态学观察和ＩＴＳ序列的系统发育分析显示，９３株酵母分别属于红冬孢酵母　属（Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）和胶红酵母属（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）的两个种［海洋红酵母（Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ　ｐａｌｕｄｉｇｅ—　ｎｌｔｍ）和胶红酵母（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓａ）］．８２株丝状真菌分别属于曲霉属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）、枝孢　属（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）、青霉属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）、链格孢属（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）、镰刀菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）、支顶孢属（Ａｃｒｅ—　ｍｏｎｉｕｍ）、茎点霉属（Ｐｈｏｍａ）、麦轴梗霉属（Ｔｒｉｔｉｒａｃｈｉｕｍ）、毛壳菌属（Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ）、外瓶霉属（　一　ｏｐｈｉａｌａ）、侧齿霉属（Ｅｎｇｙｏｄｏｎｔｉｕｍ）、肉片齿菌属（Ｓｉｓｔｏｔｒｅｍａ）、裂褶菌属（Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍ）、腥掷抱菌　属（Ｔｉｌｌｅｔｉｏｐｓｉｓ）和Ｈｏｒｍｏｎｅｍａ．其中曲霉属为丝状真菌中的优势属，占总菌株的４７．６％．上述研究结　果表明大洋深海沉积物中存在着较为丰富的真菌资源，有助于加深我们对于不同大洋区域深海环　境中真菌群落结构的认识．　关键词：海洋生物学；深海沉积物；可培养真菌；多样性；ＩＴＳ序列　ＤＯＩ：１０．３９６９／Ｊ．ＩＳＳＮ．２０９５４９７２．２０１５．０１．０１４　中图分类号：Ｐ７３５　文献标识码：Ａ　文章编号：２０９５４９７２（２０１５）０ｌ－０１０３－０８　真菌广泛存在于各种海洋环境中　，主要作为　分解者参与到海洋生态系统的物质循环中　．也有　报道提及真菌可以作为寄生菌、病原菌以及共生微　生物存在于海洋环境中　．深海是一个低温（除热　液口区域外）、高压、无光照的极端生态环境．深海　类群的发现方面取得了许多突出的进展　’　“　．而　传统的分离培养方法除了可获得深海真菌的多样性　信息外，还可以对分离获得的菌株进行生理生化分　析及其对深海高压、低温、寡营养等极端环境的适应　机制研究，对于深海真菌资源的获取与开发有重要　的极端环境造就了其丰富且广泛未知的微生物群　落，同时也给生态考察带来了很多技术上的难题．近　年来，随着深海取样技术的不断进步，对深海环境中　意义．目前已在多种深海环境中分离得到真菌菌株，　包括深海热液区［　。　、缺氧区　、冷甲烷渗出区¨　和沉积物环境¨　．这些分离培养获得的深海真菌　大多属于子囊菌门（Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ），还有少数担子菌　门（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔａ）真菌．　的真菌群落结构的研究，已经成为科学家们的一个　研究热点。。　．　１９６４年，Ｒｏｔｈ等（１９６４）首次从大西洋４　５００　ｍ　深的海水中分离到深海真菌　Ｊ．此后，越来越多的　研究开始关注各种深海环境中的真菌分离与多样性　分析．目前，对于深海真菌多样性的研究主要依赖于　传统的分离培养方法和以分子生物学为基础的免培　养方法．基于环境基因组总ＤＮＡ为基础的免培养方　本研究对来自东太平洋、南大西洋与西南印　度洋不同站位的多个深海沉积物样品进行真菌的　分离培养，并通过形态学观察结合ＩＴＳ序列分析对　所获得的真菌进行分类鉴定，为认识不同海域深　海环境中可培养真菌的多样性提供基础资料．同　时也为未来的深海真菌资源的进一步开发利用奠　定基础．　法可获得丰富的真菌多样性信息，在新的深海真菌　收稿日期：２０１４－０６－０９　基金项目：中国大洋协会资助项目（ＤＹ１２５－１５－Ｒ－０１）；国家自然科学基金资助项目（４１３７６１７１）　作者简介：徐炜（１９８７～），男，博士；Ｅ—ｍａｉｌ：ｘｗｋｈｊ＠１６３．ｅｏｍ　通讯作者：骆祝华（１９７７～），男，博士，副研究员；Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｕｏｚｈｕｈｕａ＠ｒｉｏ．ｏｒｇ．ｃｎ　・１０４・　应用海洋学学报　１材料与方法　１．１　样品采集　ｅｍ的沉积物样品以避免环境污染．将２～５　ｅｍ层次　的沉积物样品混合均匀，放人无菌袋中置于４℃中　保藏，待样品运回实验室后立即进行后期的真菌分　离．１５个沉积物样品分别来自东太平洋（６个）、南　大西洋（２个）与西南印度洋（７个）（表１）．　本实验中所用的１５个深海沉积物样品均来自　科考船“大洋一号”２１航次在２００９年１０月到２０１０　年４月所采集的深海沉积物样品．沉积物样品由电　视抓斗采集获得．样品采集到甲板后，去除表层２　表１　深海沉积物样品来源信息　Ｔａｂ．１　Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｅｅｐ　ｓｅａ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ　ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ　１．２真菌分离　１．３真菌的形态学观察　样品带回实验室，每个样品取１　ｇ沉积物用来分　真菌的形态学观察采用埋片法．在凝固的ＰＤＡ　离培养真菌．本实验采用５种不同的培养基：麦芽浸　出液琼脂培养基（ｍａｌｔ　ｅｘｔｒａｃｔ　ａｇａｒ，ＭＥＡ）、察氏琼脂　平板上用灭菌小刀开２个小槽，宽度小于１．５　ｅｍ．　把真菌菌株接种于小槽边上，盖上灭菌的盖玻片，置　培养基（ｅｚａｐｅｋ　ｄｏｘ　ａｇａｒ，ＣＤＡ）、沙氏葡萄糖琼脂培　养基（ｓａｂｏｕｒａｕｄ　ｄｅｘｔｒｏｓｅ　ａｇａｒ，ＳＤＡ）、玉米粉琼脂培　养基（ｃｏｒｎ　ｍｅａｌ　ａｇａｒ，ＣＭＡ）和马铃薯葡萄糖琼脂培　于２５℃恒温培养箱中培养．待真菌菌丝沿着盖玻片　生长后，取下盖玻片，置于载玻片上，显微镜下镜检　观察菌丝及孢子的形态．　１．４真菌ＤＮＡ提取与纯化及ＩＴＳ序列扩增　养基（ｐｏｔａｔｏ　ｄｅｘｔｒｏｓｅ　ａｇａｒ，ＰＤＡ），使用人工海水配　制，然后高温高压灭菌，冷却至６０℃后加入青霉素　和链霉素（终浓度各１　ｇ／ｄｍ　），用于抑制细菌生长．　实验中培养的成分含量减少至常规用量的１／５，用　于刺激深海寡营养环境下的真菌生长．沉积物样品　用样品稀释液（Ｒｉｎｇｅｒ　Ｓｏｌｕｔｉｏｎ）按１：１０的比例稀释　将分离获得的真菌接种到液体的ＰＹＧ培养基　中，于２５℃培养７　ｄ，将所获得的纯培养物真菌ＤＮＡ　提取采用通用的ＣＴＡＢ基因组ＤＮＡ提取法，将提取　所获得的基因组ＤＮＡ通过引物ＩＴＳ１／４（ＩＴＳＩ：５’一　ＴＣＣＧＴＡＧＧＴＧＡＡＣＣＴＧＣＧＧ－３’和ＩＴＳ４：５’一ＣＧＴ—　制成悬液，１０倍稀释平板涂布法分离¨　．涂布后的　平板置于２５℃恒温培养箱中培养，３　ｄ后每天观察　ＴＡＣＴＲＲＧＧＣＡＡＴＣＣＣＴＧＴＴＧ．３’　，Ｔｍ：５５℃）进行　ＰＣＲ扩增，每个样品做３组平行，扩增所得的ＰＣＲ　各种培养基上真菌的生长情况，并根据菌落培养性　状（菌落直径、颜色、质地、菌落反面和可溶性色素、　培养基中渗出物的有无等）简单归类并计数后¨　，　挑取不同菌落纯化，最后用甘油于一８０℃保种．　产物经质量分数为１％琼脂糖凝胶电泳检测后确定　是否为目的产物．所得的产物经ＰＣＲ产物回收试剂　盒（天根生化科技有限公司，北京）纯化后，送至测　序公司（上海美吉生物医药科技有限公司，上海）进　１期　徐炜，等：三大洋深海沉积物样品可培养真菌多样性研究　・１０５・　行测序．　表２基于ＩＴＳ序列的酵母菌株鉴定结果　Ｔａｂ．２　Ｉｄｅｎｔｉｉｃａｔｆｉｏｎ　ｏｆ　ｙｅａｓｔｓ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ＩＴＳ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　１．５真菌序列的进化分析　测序得到的ＩＴＳ序列经过ＤＮＡＳＴＡＲ软件去　除冗余序列，然后对真菌的ＩＴＳ序列进行比对分　析，把序列相似度≥９９％的序列归为一个种，每种　选择一个代表序列在ＮＣＢＩ数据库中进行Ｂｌａｓｔｎ　分析．从Ｂｌａｓｔ结果中挑选每种真菌最相近的真菌　ＩＴＳ序列，用Ｃｌｕｓｔａｌ　Ｗ进行完全比对，然后通过　２．２　丝状真菌分子鉴定结果及分析　ＭＥＧＡ　５．１采用邻位加入法（ｎｅｉｇｈｂｏｒ－ｊｏｉｎｉｎｇ　ｍｅｔｈ—　ｏｄ，ＮＪ）建立系统进化树，选择使用１　０００次重复　从东太平洋（５个站位）、南大西洋（２个站位）　及西南印度洋（７个站位）共１４个站位的沉积物中　的自展分析（ｂｏｏｔｓｔｒａｐ　ａｎａｌｙｓｉｓ）来检验系统发育树　的可信度．　共分离获得８２株丝状真菌．通过形态学观察并结合　真菌ＩＴＳ序列分子生物学分析对菌株进行鉴定．结　果显示，８２株真菌属于１５个属，它们分别是：曲霉　属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）３９株、枝孢属（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）１３株、　２结果与分析　２．１　酵母菌分子鉴定结果及分析　青霉属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）１０株、链格孢属（Ａｈｅｒｎａｒｉａ）４　株、镰刀菌属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）３株、枝顶孢属（Ａｃｒｅｍｏｎｉ—　从大西洋ＳＡ．１、ＳＡ一２和东太平洋ＥＰ一３、ＥＰ．６共　４个站位的样品中分离获得９４株酵母菌．通过对这　些酵母菌的ＩＴＳ序列进行分析，得到了酵母菌的分　子鉴定结果（表２）．Ｂｌａｓｔ结果显示９３株酵母菌ＩＴＳ　ｕｍ）２株、茎点霉属（Ｐｈｏｍａ）２株、麦轴梗霉属（Ｔｒｉｔｉ—　ｒａｃｈｉｕｍ）２株、毛壳菌属（Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ）１株、外瓶霉　属（Ｅｘｏｐｈｉａｌａ）１株、侧齿霉属（Ｅｎｇｙｏｄｏｎｔｉｕｍ）１株、　肉片齿菌属（Ｓｉｓｔｏｔｒｅｍａ）１株、裂褶菌属（Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌ—　ｌｕｒｅ）１株，腥掷孢菌属（Ｔｉｌｌｅｔｉｏｐｓｉｓ）１株和Ｈｏｒ—　ｍｏｎｅｍａ　１株．其中除菌株ＤＳＦ．２７与Ｈｏｒｍｏｎｅｍａ　ｓｐ．　序列与ＧｅｎＢａｎｋ数据库中序列相似度都在９９％一　１００％，可归为红冬孢酵母属与胶红酵母属的２个种　海洋红酵母（Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ　ｐａｌｕｄｉｇｅｎｕｍ）和胶红酵　母（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓａ）．其中３４株酵母菌是　Ｆ－０５４，２５８的序列相似度为９８％外，其余菌株与　ＧｅｎＢａｎｋ库中参照菌株序列相似性都在９９％～　１００％之问（表３）．菌株及相关信息（形态学特征和　海洋红酵母，占所鉴定酵母总菌株的３６．５６％；另外　５９株酵母菌属于胶红酵母，占所鉴定酵母总菌株的　６３．４４％．从本研究的结果中可以看出，深海沉积物　ＩＴＳ序列）均保存在中国海洋微生物菌种保藏管理　中心（ｗｗｗ．ｍｃｃｃ．ｏｒｇ．ｃｎ）．各属菌株所占总菌株数　的比例如图２．采用Ｎｅｉｇｈｂｏｕｒ—Ｊｏｉｎｉｎｇ法构建基于　样品的酵母菌的多样性不高，在南大西洋ＳＡ一１和东　太平洋ＥＰ一３、ＥＰ一６这３个站位中胶红酵母分布比例　比海洋红酵母高，而在南大西洋ＳＡ一２站位中则相　ＩＴＳ基因序列的丝状真菌系统进化树（图１），显示　所获得的丝状真菌菌株都是子囊菌门和担子菌门真　菌，其中子囊门真菌所占的比例较高，占总菌株的　９３．９％（图２）．　反．此外，本研究中有７３．３％的沉积物样品未能分　离到酵母，推测实验中所使用的培养基可能不适合　于分离培养深海酵母，故导致本实验中所获得酵母　菌的多样性不高．　表３基于ＩＴＳ序列分析的丝状真菌鉴定结果　Ｔａｂ．３　Ｉｄｅｎｔｉｉｃａｔｆｉｏｎ　ｏｆ　ｃｕｌｔｉｖａｂｌｅ　ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ　ｆｕｎｇｉ　ｗｉｔｈ　ＩＴＳ　ｇｅｎｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　・１０６・　应用海洋学学报　３４卷　ＩＴｌｏｎｅｍ，ａ（１株）、毛壳菌属（１株）、侧齿霉属（１　２．３不同大洋深海沉积物样品真菌多样性的差异　３个不同海区的菌株总体情况参见表４．东太　平洋的５个站位的沉积物分离到的３０株丝状真菌　株）、麦轴梗霉属（１株）和腥掷孢菌属（１株）．对　分离获得的真菌属在三大洋之间进行比较分析显　示（图３），三大洋都有枝孢属和青霉属真菌的分　布，东太平洋和南大西洋都有链格孢属真菌的分　布，东太平洋和西南印度洋都有曲霉属和轴梗霉　属的分布，南大西洋和西南印度洋都有茎点霉属　和镰刀菌属的分布，而其他８个属真菌则只在其　分属于６个属，分别是：曲霉属（１９株）、枝孢属（６　株）、青霉属（２株）、链格孢属（１株）、外瓶霉属（１　株）和麦轴梗霉属（１株）．在南大西洋２个站位的　沉积物分离到的１４株丝状真菌分属于７个属：青　霉属（４株）、枝孢属（３株）、链格孢属（３株）、裂褶　菌属（１株）、镰刀菌属（１株）、茎点霉属（１株）和　肉片齿菌属（１株）．西南印度洋７个站位的３８株　丝状真菌分属于１０个属，它们分别为：曲霉属（２０　中的１个大洋中有发现，且多数只分离得到１株菌　株，显示这些属的真菌可能只存在于某些特定海　域．通过对３个海域分离到的真菌菌株数和多样　性比较发现，西南印度洋分离获得的菌株最多且　多样性最高，东太平洋和南大西洋分离的菌株数　差异较大，但两者的真菌多样性相差不大．　株）、青霉属（４株）、枝孢属（４株）、枝顶孢属（２　株）、镰刀菌属（２株）、链格孢属（１株）、Ｈｏｔ—　１期　徐炜，等：三大洋深海沉积物样品可培养真菌多样性研究　・１０７・　］　，●●　，●　●●　●　，　●，ｒ　●　●　●　●　●　●日　００　ｇ００∽《　图１　采用Ｎｅｉｇｈｂｏｕｒ－－Ｊｏｉｎｉｎｇ法构建的基于ＩＴＳ序列的深海沉积物丝状真菌系统进化树　Ｆｉｇ．１　Ｎｅｉｇｈｂｏｕｒ。ｊｏｉｎｉｎｇ　ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｔｒｅｅ　ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｅｄ　ｗ：＇ｔｈ　ＩＴＳ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕ　ｓ　ｆ￣ｎｇｉ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ　括号内代表每种真菌在各个海区的菌株数，其中ＥＰ表示东太平洋海域沉积物样品；　ｓＡ表示南大西洋沉积物样品；ＳＷＩ表示西南印度洋沉积物样品　应用海洋学学报　３４卷　图２深海沉积物中可培养真菌的群落组成　Ｆｉｇ．２　Ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｆｕｎｇｉ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ　表４三大洋海区沉积物中可培养丝状真菌的多样性　Ｔａｂ．４　Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ｃｕｌｔｉｖａｂｌｅ　ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ　ｆｕｎｇｉ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｅｄｉｎｌｅｎｔｓ　ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｒｅｅ　ｏｃｅａｎ　ａｒｅａｓ　可培养丝状真菌菌数／株　真菌属——　东太平洋　南大西洋　西南印度洋　枝孢属（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｔｕｎ）　６　３　青霉属（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）　２　４　曲霉属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｈ￣ｓ）　１９　一　外瓶霉属（Ｅｘｏｐｈｉａｌａ）　ｌ　一　链格孢属（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）　ｌ　３　麦轴梗霉属（Ｔｒｉｔｉｒａｃｈｉｕｍ）　ｌ　一　肉片齿菌属（Ｓｉｓｔｏｔｒｅｒｎａ）　一　１　茎点霉属（Ｐｈｏｍａ）　一　１　侧齿霉属（Ｅｎｇｙｏｄｏｎｔｉｕｍ）　一　一　枝顶孢属（Ａｃｒｅｎｗｎｉｕｍ）　一　一　裂褶菌属（Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍ）　一　１　镰刀菌属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）　一　１　毛壳菌属（Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ）　一　腥掷孢菌属（Ｔｉｌｌｅｔｉｏｐｓｉｓ）　一　一　Ｈｏｒ　ｍｎｅ７ｎ０　一　一　共计　３０　ｌ４　注：“一”表示无数据　３讨论　３．１酵母茵多样性　本研究中从三大洋海域１５个沉积物样品中分　离得到９３株酵母菌与８２株丝状真菌，这些真菌属　于１８个属．分离获得的两个酵母种海洋红酵母和胶　红酵母是海洋中普遍存在的酵母类群　＇　．分离得　到的丝状真菌以子囊菌门真菌为主，担子菌门真菌　图３文氏图显，下３个不同海区所　获得的真菌属问的差异　Ｆｉｇ．３　Ｖｅｎｎ　ｄｉａｇｒａｍ　ｏｆ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｇｅｎｕｓ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｉ＇ｏｍ　ｔｈｒｅｅ　Ｏｃｅａｎ　ａｒｅａｓ　较少，这与已发表的深海可培养真菌研究结果相　４　４　一　一　●　一　１　２　似　邶，。。’　．　３．２子囊菌门真菌多样－眭　深海沉积物中已分离得到的子囊真菌共有粪壳　菌纲（Ｓｏｒｄａｒｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）、座囊菌纲（Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅ—　ｔｅｓ）、酵母菌纲（Ｓａｃｃｈａｒ０ｍｙｃｅｔｅｓ）、囊菌纲（Ｅｕｒｏｔｉｏ—　ｍｙｃｅｔｅｓ）和锤舌菌纲（Ｌｅｏｔｉｏｍｙｃｅｔｅｓ）５个　纲　，　＇。　．本研究中共分离到了其中３个纲的子　囊真菌，比例最高的为散囊菌纲，之后是座囊菌纲和　粪壳菌纲．此外，还有１株真菌属于子囊菌门半知菌　类（ＤＳＦ一２２）．在散囊菌纲中最常见的是曲霉属和青　霉属真菌，这类真菌在各个生态系统中都是较为常　见的真菌属，在海洋环境（包括深海环境）和陆地环　境中广泛存在．有研究显示，深海中分离到的一些曲　霉属真菌具有耐高压的典型深海环境适应性特征，　被认为是海洋环境中的内源（土著）真菌¨　＇　。　．座　囊菌纲是一类双囊壁的子囊真菌，深海环境中常被　分离到的这一纲的真菌大多为枝孢属真菌，该属的　真菌在深海环境中常能演化出抗低温、高盐和高渗　透压的特征，被认为是它们可以在深海环境中生存　的关键因素　Ｊ．另一个该纲的真菌茎点霉属也常出　现在深海环境中¨　．茎点霉属真菌是海洋动植物　的常见共生菌，在海洋植物（海藻和海草）和无脊椎　动物（海绵等）中都有分离到　．本研究中还获得　了毛壳菌属和链格孢属的真菌，这两类也是常出现　在海洋环境中的真菌．本研究中获得的粪壳菌纲的　真菌主要属是镰刀菌属和枝顶孢属．在深海环境中　该纲真菌所含的种类较少且只存在特定的区域，例　如在深海厌氧区就有分离到具有反硝化功能的海洋　真菌尖孢镰刀菌¨　，以及在深海热液区环境中分离　获得的枝顶孢菌¨　，但这两个属的真菌在深海海底　表层沉积物环境中还未见分离获得．本研究的结果　进一步拓展了这一真菌类群在深海环境中的分布信　—　１期　徐炜，等：三大洋深海沉积物样品可培养真菌多样性研究　・１０９・　息，加深了对粪壳菌纲真菌的认识．　３．３担子菌门真菌多样性　本研究从沉积物中仅仅获得４个纲的担子菌真　海环境中的生理特征与生态功能提供了基础．本研　究分离到一株外担菌纲的真菌Ｔｉｌｌｅｔｉｏｐｓｉｓ　ａｌｂｅｓｃｅｎｓ，　该种真菌之前曾在青海湖水生环境中作为耐盐真菌　分离获得　，由此推测该属真菌具有耐盐性，适宜　在深海极端环境生存．　本研究分离获得的大多数真菌菌株都是已知菌　菌：Ｔｒｉｔｉｒａｃｈｉｏｍｙｃｅｔｅｓ、伞菌纲（Ａｇａｒｉｃｏｍｙｃｅｔｅｓ）、外　担菌纲（Ｅｘ０ｈａｓ　０ｍｙｃｅｔｅｓ）和微球黑粉菌纲（Ｍｉ—　ｃｒｏｂｏｔｒｙｏｍｙｃｅｔｅｓ）．微球黑粉菌纲是海洋中的一种常　见的酵母菌，且通常以担孢酵母目中的海洋酵母形　式出现　．已有的研究通过培养和分子生物学方法　均没有发现深海中Ｔｒｉｔｉｒａｃｈｉｏｍｙｃｅｔｅｓ纲真菌的相关　株，很多真菌在其他的深海环境中都有报道．Ｊｅｂａｒａｊ　等（２０１０）指出在厌氧环境下分离真菌更容易得到　一些新的真菌类群¨　．因此，多样化的分离培养方　报道，本研究成果进一步拓展了深海真菌的类群．伞　菌纲的真菌在海洋环境中的报道多见于红树　林¨’“Ｊ．尽管不依赖培养的分子生物学研究显示伞　菌纲的真菌类群在深海环境中无处不在　，　“Ｊ，但　法对于获得更多类群的未知真菌具有重要作用．已　报道免培养的真菌多样性研究结果显示深海沉积物　环境中存在着大量未知的真菌种类，亟待人们去发　现．因此要不断提高真菌分离培养技术，以期获得更　多的真菌菌株，从而进一步加深对深海真菌群落结　构的认识，这将更有助于我们了解深海真菌对极端　环境的适应机制及其与深海生态系统中其他生物类　群的相互作用机制．　是目前只有１种可培养的该纲真菌拟孔菌属是从深　海的热液区环境中分离到的．本研究从深海沉积物　环境中共分离到两种该纲的真菌（Ｓｉｓｔｏｔｒｅｍａ　ｂｒｉｎｋ—　ｍａｎｎｉｉ和裂褶菌），为进一步研究该真菌类群在深　参考文献：　［１］　Ｊｏｎｅｓ　Ｅ　Ｂ　Ｇ，Ｓａｋａｙａｒｏｊ　Ｊ，Ｓｕｅｔｒｏｎｇ　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｃｌａｓｓｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｍａｒｉｎｅ　Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ，ａｎａｍｏｒｐｈｉｃ　ｔａｘａ　ａｎｄ　Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔａ［Ｊ］．　Ｆｕｎｇａｌ　Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００９，３５：１—１８７．　［２］Ｈｙｄｅ　Ｋ　Ｄ，Ｊｏｎｅｓ　Ｅ　Ｇ，Ｌｅａｉｆｏ　Ｅ，ｅｔ　ａ１．Ｒｏｌｅ　ｏｆｆｕｎｇｉ　ｉｎ　ｍａｒｉｎｅ　ｅｃｏｓｙｓｔｅｍｓ［Ｊ］．Ｂｉｏｄｉｖｅｒｓｉｔｙ＆Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ，１９９８，７（９）：　ｌ　１４７—１　１６１．　［３］　Ｋｏｈｌｍｅｙｅｒ　Ｊ，Ｋｏｈｌｍｅｙｅｒ　Ｅ．Ｍａｒｉｎｅ　ｍｙｃｏｌｏｇｙ：ｔｈｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｆｕｎｇｉ［Ｍ］．Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ，Ｓａｎ　Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，Ｌｏｎｄｏｎ：Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒｅｓｓ　Ｉｎｃ．，　１９７９．　［４］Ｐｉｖｋｉｎ　Ｍ　Ｖ．Ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ　ｆｕｎｇｉ　ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｈｏｌｏｔｈｕｒｉａｎｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　Ｓｅａ　ｏｆ　Ｊａｐａｎ，ｏｆｆ　ｔｈｅ　Ｐｒｉｍｏ￣ｅ　ｃｏａｓｔ　ｏｆ　Ｒｕｓｓｉａ［Ｊ］．Ｔｈｅ　Ｂｉ—　ｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｂｕｌｌｅｔｉｎ，２０００，１９８（１）：１０１—１０９．　［５］Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ　Ｃ．Ｆｕｎｇａｌ　ｐａｒａｓｉｔｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍａｒｉｎｅ　ｇｒｅｅｎ　ａｌｇａｅ，Ｃｌａｄｏｐｈｏｒａ　ａｎｄ　Ｒｈｉｚｏｃｌｏｎｉｕｍ［Ｊ］．Ｂｏｔａｎｉｃａ　Ｍａｒｉｎａ，１　９８６，２９　（４）：２８９—２９８．　［６］　Ｎａｇａｈａｍａ　Ｔ，Ｎａｇａｎｏ　Ｙ．Ｃｕｌｔｕｒｅｄ　ａｎｄ　ｕｎｃｕｌｔｕｒｅｄ　ｆｕｎｇａｌ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｉｎ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｓ［Ｍ］／／Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ　Ｃ．Ｂｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｍａｒｉｎｅ　Ｆｕｎｇｉ．Ｂｅｒｌｉｎ：Ｓｐｒｉｎｇｅｒ—Ｖｅｒｌａｇ，２０１２：１７３—１８７．　［７］　Ｎａｇａｎｏ　Ｙ，Ｎａｇａｈａｍａ　Ｔ，Ｈａｔａｄａ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｆｕｎｇａｌ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｉｎ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ—ｔｈｅ　ｐｒｅｓｅｎｃｅ　ｏｆ　ｎｏｖｅｌ　ｆｕｎｇａｌ　ｇｒｏｕｐｓ［Ｊ］．Ｆｕｎ—　ｇａｌ　Ｅｃｏｌｏｇｙ，２０１０，３（４）：３１６—３２５．　［８］Ｒｏｔｈ　Ｊｒ　Ｆ，Ｏｒｐｕｒｔ　Ｐ，Ａｈｅａｒｎ　Ｄ．Ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｕｎｇｉ　ｉｎ　ａ　ｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌ　ｍａｒｉｎｅ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ［Ｊ］．Ｃａｎａｄｉａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｏｔａｎｙ，１９６４，４２（４）：３７５—３８３．　［９］　Ｂａｓｓ　Ｄ，Ｈｏｗｅ　Ａ，Ｂｒｏｗｎ　Ｎ，ｅｔ　ａ１．Ｙｅａｓｔ　ｆ０ｒｍｓ　ｄｏｍｉｎａｔｅ　ｆｕｎｇａｌ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｅｅｐ　ｏｃｅａｎｓ［Ｊ］．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｒｏｙａｌ　Ｓｏｃｉ—　ｅｔｙ　Ｂ：Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２００７，２７４（１６２９）：３　０６９—３　０７７．　［１０］Ｌａｉ　Ｘ，Ｃａｏ　Ｌ，Ｔａｎ　Ｈ，ｅｔ　ａ１．Ｆｕｎｇａｌ　ｃｏｍｍｕｎｉｔｉｅｓ　ｒｆｏｍ　ｍｅｔｈａｎｅ　ｈｙｄｒａｔｅ—ｂｅａｒｉｎｇ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｍａｒｉｎｅ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ　ｉｎ　Ｓｏｕｔｈ　Ｃｈｉｎａ　Ｓｅａ　［Ｊ］．Ｔｈｅ　ＩＳＭＥ　Ｊｏｕｒｎａｌ，２００７，１（８）：７５６－７６２．　［１　１］　Ｎａｇａｈａｍａ　Ｔ，Ｔａｋａｈａｓｈｉ　Ｅ，Ｎａｇａｎｏ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｅｖｉｄｅｎｃｅ　ｔｈａｔ　ｄｅｅｐ—ｂｒａｎｃｈｉｎｇ　ｆｕｎｇｉ　ａｒｅ　ｍａｊｏｒ　ｆｕｎｇａｌ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｍｅｔｈａｎｅ　ｃｏｌｄ—ｓｅｅｐ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１１，１３（８）：２　３５９—２　３７０．　［１２］　Ｂｕｒｇａｕｄ　Ｇ，Ａｒｚｕｒ　Ｄ，Ｄｕｒａｎｄ　Ｌ，ｅｔ　ａ１．Ｍａｒｉｎｅ　ｃｕｌｔｕｒａｂｌｅ　ｙｅａｓｔｓ　ｉｎ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｈｙｄｒｏｔｈｅｒｍａｌ　ｖｅｎｔｓ：ｓｐｅｃｉｅｓ　ｒｉｃｈｎｅｓｓ　ａｎｄ　ａｓｓｏｃｉａ—　ｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｆａｕｎａ［Ｊ］．ＦＥＭＳ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　Ｅｃｏｌｏｇｙ，２０１０，７３（１）：１２１—１３３．　［１３］　Ｂｕｒｇａｕｄ　Ｇ，Ｌｅ　Ｃａｌｖｅｚ　Ｔ，Ａｒｚｕｒ　Ｄ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ｃｕｌｔｕｒａｂｌｅ　ｍａｒｉｎｅ　ｉｆｌａｍｅｎｔｏｕｓ　ｆｕｎｇｉ　ｆｒｏｍ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｈｙｄｒｏｔｈｅｒｍａｌ　ｖｅｎｔｓ　［Ｊ］．Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００９，１１（６）：１　５８８—１　６００．　［１４］Ｌｅ　Ｃａｌｖｅｚ　Ｔ，Ｂｕｒｇａｕｄ　Ｇ，Ｍａｈ６　Ｓ，ｅｔ　ａ１．Ｆｕｎｇａｌ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｉｎ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｈｙｄｒｏｔｈｅｒｍａｌ　ｅｃｏｓｙｓｔｅｍｓ［Ｊ］．Ａｐｐｌｉｅｄ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎ—　ｔａｌ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２００９，７５（２０）：６　４１５—６　４２１．　［１５］　Ｊｅｂａｒａｊ　Ｃ　Ｓ，Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ　Ｃ，Ｂｅｈｎｋｅ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｆｕｎｇａｌ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｉｎ　ｏｘｙｇｅｎ—ｄｅｐｌｅｔｅｄ　ｒｅｇｉｏｎｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｒａｂｉａｎ　Ｓｅａ　ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｂｙ　ｔａｒ—　・１１０・　应用海洋学学报　３４卷　ｇｅｔｅｄ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ　ｃｏｍｂｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＦＥＭＳ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　Ｅｃｏｌｏｇｙ，２０１０，７１（３）：３９９－４１２．　［１６］　Ｔａｋｉｓｈｉｔａ　Ｋ，Ｙｕｂｕｋｉ　Ｎ，Ｋａｋｉｚｏｅ　Ｎ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　ｅｕｋａｒｙｏｔｅｓ　ｉｎ　ｓｅｄｉｍｅｎｔ　ａｔ　ａ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｍｅｔｈａｎｅ　ｃｏｌｄ　ｓｅｅｐ：ｓｕｒ—　ｖｅｙｓ　ｏｆ　ｒｉｂｏｓｏｍａｌ　ＤＮＡ　ｌｉｂｒａｒｉｅｓ　ｆｒｏｍ　ｒａｗ　ｓｅｄｉｍｅｎｔ　ｓａｍｐｌｅｓ　ａｎｄ　ｔｗｏ　ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ［Ｊ］．Ｅｘｔｒｅｍｏｐｈｉｌｅｓ，２００７，１　１（４）：　５６３—５７６．　ｅ　Ｓ．Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ　Ｃ，Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ　Ｓ．Ｆｕｎｇｉ　ｉｎ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｉｎｄｉａｎ　Ｂａｓｉｎ［Ｊ］．Ｄｅｅｐ　Ｓｅａ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　［１７］　ＤａｍａｒＰａｒｔ　Ｉ：Ｏｃｅａｎｏｇｒａｐｈｉｃ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｐａｐｅｒｓ，２００６，５３（１）：１４—２７．　［１８］　［１９］　Ｓｉｎｇｈ　Ｐ．Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ　Ｃ，Ｍｅｅｎａ　Ｒ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｆｕｎｇａｌ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｉｎ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ　ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｂｙ　ｃｕｌｔｕｒｅ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ａｎｄ　ｃｕｌ—　ｔｕｒｅ—ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ［Ｊ］．Ｆｕｎｇａｌ　Ｅｃｏｌｏｇｙ，２０１２，５（５）：５４３—５５３．　Ｓｉｎｇｈ　Ｐ，Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ　Ｃ，Ｖｅｒｍａ　Ｐ，ｅｔ　ａ１．Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ｃｕｈｕｒａｂｌｅ　ｆｕｎｇｉ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｉｎｄｉａｎ　Ｂａｓｉｎ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｇｒｏｗｔｈ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ［Ｊ］．Ｆｕｎｇａｌ　Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１０，４０（１）：８９—１０２．　Ｘ　Ｙ，Ｚｈａｎｇ　Ｙ，Ｘｕ　Ｘ　Ｙ，ｅｔ　ａ１．Ｄｉｖｅｒｓｅ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｆｕｎｇｉ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｓｏｕｔｈ　ｃｈｉｎａ　ｓｅａ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ａｎｔｉｍｉｅｒｏｂｉａｌ　ａｃｔｉｖｉｔｙ［Ｊ］．　［２０］　Ｚｈａｎｇ　Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，２０１３，６７（５）：５２５—５３０．　［２１］　［２２］　Ｇａｄａｎｈｏ　Ｍ．Ｓａｍｐａｉｏ　Ｊ　Ｐ．Ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ　ａｎｄ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ｙｅａｓｔｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍｉｄ—Ａｔｌａｎｔｉｃ　ｒｉｄｇｅ　ｈｙｄｒｏｔｈｅｒｍａｌ　ｆｉｅｌｄｓ　ｎｅａｒ　ｔｈｅ　Ａｚｏｒｅｓ　Ａｒ—　ｃｈｉｐｅｌａｇｏ［Ｊ］．Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ｅｃｏｌｏｇｙ，２００５，５０（３）：４０８４ｌ７．　Ｓｉｎｇｈ　Ｐ，Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ　Ｃ，Ｖｅｒｍａ　Ｐ，ｅｔ　ａ１．ＦｕｎｇＮ　ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｃｅｎｔｒａｌ　Ｉｎｄｉａｎ　Ｂａｓｉｎ　ｂｙ　ｃｕｌｔｕｒｅ—ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ａｐｐｒｏａｃｈ［Ｊ］．Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ　Ｅｃｏｌｏｇｙ，２０１１，６１（３）：５０７—５１７．　［２３］　Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ　Ｃ，Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ　Ｓ．Ｂａｒｏｔｏｌｅｒａｎｃｅ　ｏｆ　ｆｕｎｇｉ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｉｎｄｉａｎ　Ｏｃｅａｎ［Ｊ］．Ａｑｕａｔｉｃ　Ｍｉ—　ｅｒｏｂｉａｌ　Ｅｃｏｌｏｇｙ，１９９８，１５：１５３—１６３．　［２４］　Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ　Ｃ，Ｒａｇｈｕｋｕｍａｒ　Ｓ，Ｓｈｅｅｌｕ　Ｇ，ｅｔ　ａ１．Ｂｕｒｉｅｄ　ｉｎ　ｔｉｍｅ：ｃｕｈｕｒａｂｌｅ　ｆｕｎｇｉ　ｉｎ　ａ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｓｅｄｉｍｅｎｔ　ｃｏｒｅ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　Ｃｈａｇｏｓ　Ｔｒｅｎｃｈ，Ｉｎｄｉａｎ　Ｏｃｅａｎ［Ｊ］．Ｄｅｅｐ　Ｓｅａ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｐａｒｔ　Ｉ：Ｏｃｅａｎｏｇｒａｐｈｉｃ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｐａｐｅｒｓ，２００４，５１（１１）：１　７５９—１　７６８．　ｍｅｙｅｒ　Ｊ，Ｖｏｌｋｍａｎｎ—Ｋｏｈｈｎｅｙｅｒ　Ｂ．Ｉｌｌｕｓｔｒａｔｅｄ　ｋｅｙ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｍａｒｉｎｅ　ｆｕｎｇｉ［Ｊ］．Ｂｏｔａｎｉｃａ　Ｍａｒｉｎａ，１９９１，３４　［２５］　Ｋｏｈｌ（１）：１—６１．　王欢，赵朋，等．分离自青海湖可培养耐盐真菌的多样性研究［Ｊ］．菌物学报，２０１２，３ｌ（２）：１８７—１９５．　［２６］　谢占玲，Ｆｕｎｇａｌ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｓｔｕｄｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｅｅｐ　ｓｅａ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｏｃｅａｎｓ　ｂｙ　ｃｕｌｔｕｒｅ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ａｐｐｒｏａｃｈ　ｘｕ　Ｗｅｉ，ＬＩ　Ｇｕａｎｇ—ｗｅｉ，ＨＵＡＮＧ　Ｘｉａｎｇ—ｌｉｎｇ，ＬＵＯ　Ｚｈｕ—ｈｕａ　（Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｍａｉｒｎｅ　Ｂｉｏｇｅｎｅｔｉｃ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，Ｔｈｉｒｄ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｏｃｅａｎｏｇｒａｐｈｙ，ＳＯＡ，Ｘｉａｍｅｎ　３６１００５，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｆｕｎｇｉ　ａｒｅ　ａｎ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ　ｏｆ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ　ａｎｄ　ｐｌａｙ　ｖｉｔａｌ　ｒｏｌｅｓ　ｉｎ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｅ—　ｅｏｓｙｓｔｅｍｓ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅ　ｋｎｏｗｌｅｄｇｅ　ａｂｏｕｔ　ｆｕｎｇｉ　ｉｎ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｓ　ｉｓ　ｌｉｍｉｔｅｄ．Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ，１５　ｓａｍｐｌｅｓ　ｉｎ　ｄｅｅｐ　ｓｅａ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｒｅｅ　ｏｃｅａｎ　ａｒｅａｓ（Ｓｏｕｔｈ　Ａｔｌａｎｔｉｃ　Ｏｃｅａｎ，Ｅａｓｔ　Ｐａｃｉｉｆｃ　Ｏｃｅａｎ，ａｎｄ　Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ　Ｉｎｄｉａｎ　Ｏ—　ｅｅａｎ）ｗｅｒｅ　ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｓｔｕｄｙ　ｂｙ　ｃｕｌｔｕｒｅ—ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ　ａｐｐｒｏａｃｈ．Ａ　ｔｏｔａｌ　ｏｆ　１７５　ｆｕｎｇａｌ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｗｅｒｅ　ｉｓｏｌａ—　ｔｅｄ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　９３　ｙｅａｓｔ　ｓｔｒａｉｎｓ　ａｎｄ　８２　ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ　ｆｕｎｇｉ　ｓｔｒａｉｎｓ．Ｔｈｅ　ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ＩＴＳ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｆｕｎｇａｌ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｙｅａｓｔｓ　ｂｅｌｏｎｇ　ｔｏ　２　ｓｐｅｃｉｅｓ，Ｒｈｏｄｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ　ｐａｌｕｄｉｇｅｎｕｍ　ａｎｄ　Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓａ．　Ｅｉｇｈｔｙ－ｔｗｏ　ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ　ｆｕｎｇａｌ　ｓｔｒａｉｎｓ　ｗｅｒｅ　ａｆｉｌｉａｔｅｄ　ｗｉｆｔｈ　１　５　ｆｕｎｇａｌ　ｇｅｎｅｒａ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ，Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ，　Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ，Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ，Ｆｕｓａｒｉｕｍ，Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ，Ｐｈｏｍａ，Ｔｒｉｔｉｒａｃｈｉｕｍ，Ｃｈａｅｔｏｍｉｕｍ，Ｅｘｏｐｈｉａｌａ，Ｅｎｇｙｏｄｏｎｔｉｕｍ，　Ｓｉｓｔｏｔｒｅｍａ．Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍ．Ｔｉｌｌｅｔｉｏｐｓｉｓ　ａｎｄ　Ｈｏｒｍｏｎｅｍａ．Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ａｃｃｏｕｎｔｉｎｇ　ｆｏｒ　４７．６％ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｏｔａｌ　ｆｉｌａｍｅｎｔｏｕｓ　ｆｕｎｇａｌ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｉｓ　ａ　ｄｏｍｉｎａｎｔ　ｇｅｎｕｓ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｔｈａｔ　ａ　ｈｉｇｈ　ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　ｆｕｎｇｉ　ｉｎ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｏｃｅａｎｓ　ａｎｄ　ｈａｖｅ　ｐｒｏｖｉｄｅｄ　ａ　ｋｅｙ　ｉｎｓｉｇｈｔ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ｃｏｍｍｕｎｉｔｙ　ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｕｎｇｉ　ｉｎ　ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｍａｒｉｎｅ　ｂｉｏｌｏｇｙ；Ｄｅｅｐ—ｓｅａ　ｓｅｄｉｍｅｎｔｓ；ｃｕｌｔｉｖａｂｌｅ　ｆｕｎｇｉ；ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ；ＩＴＳ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ＤＯｌ：１０．３９６９／Ｊ．ＩＳＳＮ．２０９５－４９７２．２０１５．０１．０１４　（责任编辑：王静）